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淺述熒光定量PCR試劑盒的技術(shù)優(yōu)點
點擊次數(shù):1053 更新時間:2021-07-26
  熒光定量PCR試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的聯(lián)絡(luò)只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,參與板孔中的標本,其間的抗原并不是都有對等的和固相抗聯(lián)絡(luò)的機遇,只需靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。才能到達反應(yīng)的結(jié)束。在這以后參與的酶符號抗體與固相抗原的聯(lián)絡(luò)也相同如此,這便是為何老是需要一定時間的溫育。
  PCR是一種*的技術(shù),具有廣泛的應(yīng)用,包括生物醫(yī)學(xué)研究和刑事取征。沒錯,這就是RT-PCR技術(shù)和實時熒光定量PCR技術(shù)結(jié)合在了一起。實時定量中,RNA鏈也是首先通過逆轉(zhuǎn)錄過程,形成與其互補的DNA鏈,再以此DNA鏈作為模板進行實時熒光定量PCR反應(yīng),完成DNA的擴增,此技術(shù)在目的RNA段的檢測之中被廣泛應(yīng)用。
  在PCR延伸反應(yīng)中,酶的外切活性將5’端熒光基團從探針上切割下來,使之游離于反應(yīng)體系中,從而脫離了3’端熒光淬滅基團的屏蔽,分離后的熒光基團在機器特定光源的激發(fā)下產(chǎn)生熒光,再由儀器的檢測單元進行檢測,從而實現(xiàn)對FCV的特異性檢測。
  熒光定量PCR試劑盒使用內(nèi)質(zhì)控體系,能夠?qū)崟r監(jiān)測整個檢測過程,有效防止假陰性結(jié)果的產(chǎn)生。其主要優(yōu)點包括:
  1、基線噪音小,陽性信號明顯,非常容易判斷陰陽性;
  2、靈敏度高,能夠檢測出感染早期的弱陽性樣本;
  3、設(shè)置有內(nèi)標,可以監(jiān)控從提取到RCR檢測的全過程,可及時排除假陰性結(jié)果;
  4、反應(yīng)性好,可檢出不同基因型的病毒和基因變異的病毒。
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